1989 ägde den första kulturnatten rum som ett upprop från kulturlivet till politiker i Uppsala kommun på det skriande behovet av kulturlokaler. Initiativet togs av dåvarande kulturchef Frans-Olof Brunzell, dåvarande teaterchef Åke Lundqvist, Upsala Stadsteater, dåvarande chefredaktör Arne Nygren, UNT och dåvarande chef för Radio Uppland, Mats Åkerlund tillsammans med kulturlivet i Uppsala.
Den första kulturnatten hade 37 arrangörer som tillsammans presenterade 96 program på ett fåtal platser i Uppsala. Sedan dess har kulturmanifestationen bara växt. 2012 medverkade ca 242 arrangörer med 650 olika programpunkter på 148 platser runt om i Uppsala. Antalet program riktade till barn var fler än tidigare, totalt 75 st (84 st 2011). Publiken beräknas till omkring 150.000.
