1989 ägde den första kulturnatten rum som ett upprop från kulturlivet till politiker i Uppsala kommun på det skriande behovet av kulturlokaler. Initiativet togs av dåvarande kulturchef Frans-Olof Brunzell, dåvarande teaterchef Åke Lundqvist, Upsala Stadsteater, dåvarande chefredaktör Arne Nygren, UNT och dåvarande chef för Radio Uppland, Mats Åkerlund tillsammans med kulturlivet i Uppsala.
Den första kulturnatten hade 37 arrangörer som tillsammans presenterade 96 program på ett fåtal platser i Uppsala. Sedan dess har kulturmanifestationen bara växt. 2010 medverkade ca 210 arrangörer med 565 olika programpunkter på 160 platser runt om i Uppsala. 40 program var speciellt riktade till barn. Publiken beräknas till omkring 100.000.
